良性骨肿瘤

人microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系9607和U2-os转染及筛选相关方法的讨论

2015-06-30   文章来源:第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所 韩康    我要说

  目的:构建针对人 micro-194过表达及抑制表达的慢病毒表达载体,并寻找探讨感染人骨肉瘤细胞系9607和U2-os的最佳步骤和方法。

  方法:利用PCR方法调取相应目的基因进行酶切,经电泳回收后与目的基因进行连接,产物转化细菌感受态细胞,对克隆进行PCR鉴定和测序对比分析后,构建相应microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒表达载体;在人骨肉瘤细胞系9607和U2-os转染及筛选过程中,根据不同阶段及浓度设定相应实验组,并设相应对照组。倒置显微镜观察转染效率,筛选情况,进行比较。

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