刘泽远  张文苹  黄强开  李刚  陈治  韦健  梁炳生

目的 探讨miRNA-1在大鼠早期失神经支配后骨骼肌中不同时段的表达，以及被动运动对失神经骨骼肌miRNA-1表达及成肌细胞分化的影响。

方法 取SD大鼠27只，体质量（200±10） g，随机分为假手术组（A组，n=3）、失神经组（B组，n=12）和失神经被动运动组（C组，n=12）。各组大鼠显露右侧坐骨神经并游离，B、C组切除坐骨神经长约1 cm，A组仅显露游离神经不切除；术后1 d 起，对C组大鼠右后肢行被动屈伸运动。A组于术后6 h，B、C组分别于术后3、7、14、28 d，采用颈椎脱臼法各处死3只大鼠，测量腓肠肌湿重比以及行HE染色观察腓肠肌细胞直径，对肌萎缩情况进行综合评价；采用RT-PCR法检测miRNA-1、肌分化因子（myocyte differentiation factor，MyoD）基因表达，免疫组织化学染色观察MyoD蛋白表达。

结果 B、C组腓肠肌失神经后均有不同程度萎缩，随失神经时间延长，肌纤维排列逐渐紊乱，肌细胞直径逐渐减小，失去正常的结构形态。B、C组术后各时间点腓肠肌湿重及肌细胞直径均小于A组（P<0.05）；B、C组间除术后3 d腓肠肌湿重比以及术后3、28 d肌细胞直径比较差异无统计学意义（P>0.05）外，其余各时间点C组均大于B组（P<0.05）。术后随时间延长，B、C组miRNA-1和MyoD 基因相对表达量呈逐渐升高趋势，但各时间点均显著低于A组（P<0.05）；B、C组间除术后3 d比较差异无统计学意义外（P>0.05），术后7、14、28 d C组miRNA-1和MyoD基因相对表达量均高于B组（P<0.05）。免疫组织化学染色示A、B、C组各时间点MyoD均呈阳性表达，A组阳性表达少于B、C组；B、C组随失神经时间延长，阳性表达逐渐增多，且C组各时间点阳性表达均多于B组。相关性分析结果示miRNA-1、MyoD分别与腓肠肌湿重比在3、7 d时无相关性（P>0.05），14、28 d时成正相关（P<0.05）；各时间点MyoD与miRNA-1基因相对表达量成正相关（P<0.05）。

结论 被动运动可能通过促进miRNA-1的表达，以促进肌细胞分化发挥防止失神经骨骼肌萎缩的作用。