祝勇  杨学军  霍洪军  肖宇龙  方鑫  苏秀兰  邢文华  赵岩  付裕

目的:探讨椎间盘组织中转化生长因子-β （transforming growth factor-β,TGF-β）通路调节胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）表达的相关分子机制.

方法:在体外培养小鼠椎间盘组织,用肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factora,TNF-α）模拟椎间盘突出时的炎症微环境,利用TGF-β通路的抑制剂或核因子-κB （nuclear factor-kappaB,NF-κB）抑制剂培养后,用ELISA法、免疫组化法及Western法测定椎间盘组织中TSLP的变化.

结果:（1）TNF-α组的磷酸化NF-κB的阳性细胞率为92.4％±1.4％,对照组为9.4％±3.3％.加入TGF-β Ⅰ型受体抑制剂的HTS组磷酸化NF-κB的阳性细胞率为74.1％±6.7％;Western blot结果显示：HTS组和TNF-α组分别与对照组比较,表达磷酸化NF-κB明显增高,差异有统计学意义.（2）ELISA结果显示：HTS组表达TSLP为（482.8±44.5） pg/ml,对照组为（66.8±4.2） pg/ml,加入IMD和MG后,其表达TSLP下调.（3）TGF-β通路主要因子Smad 2/3的免疫组化结果显示：对照组中磷酸化Smad 2/3的阳性细胞率为46.6％±3.3％,HTS组为23.7％±10.9％,两者比较差异有统计学意义;Western blot结果显示：HTS组与对照组相比,表达磷酸化Smad 2/3明显下调.（4）ELISA结果显示：HTS组上调了TSLP的表达,MCP-1、IL-6均表达下调,MMP-3的表达无变化.

结论:在生理条件下,椎间盘组织中内源性TGF-β通过抑制NF-κB的活性限制了TSLP的表达;当椎间盘突出时,内源性的稳态系统被打破,TGF-β活性下降或缺失,抑制NF-κB的能力下降,而后者促使TSLP生成增加,促进椎间盘突出重吸收.