赵久茗    何斯荣    王成世    刘敬平   李胜富    陈又南     陆燕蓉    程惊秋

摘要:目的研究恒河猴BMSCs在缺氧再给氧环境下对新生猪胰岛活性和功能的保护作用。 方法取健康成年恒河猴5只，体重6～10 kg，取骨髓采用骨髓单核细胞贴壁培养法筛选获得BMSCs；取3～5日龄新生长白猪5 只，取胰腺以Ⅴ型胶原酶消化制备新生猪胰岛。将实验分为胰岛正常组（A组）、胰岛加BMSCs正常组（B组）、胰岛缺氧再给氧组（C组）、胰岛加BMSCs缺氧再给氧组（D组），观察比较常规培养和缺氧（1%O2）12 h再给氧24 h或48 h条件下，胰岛的功能活性变化：二乙酸荧光素/碘化丙啶（propidium iodide，PI）染色计算胰岛成活率；细胞计数试剂盒8法检测新生猪胰岛的代谢活性；膜联蛋白V-FITC/PI标记后流式细胞仪检测胰岛凋亡率；葡萄糖刺激法分析胰岛功能糖刺激指数（stimulation index，SI）。 结果C组较A、B组胰岛团更为分散，死亡细胞增多；D组较C组胰岛团完整，成活率更高。A、B、C、D组胰岛成活率分别为90.2% ± 9.1%、88.3% ± 5.9%、52.3% ± 12.1%、71.4% ± 11.5%，C、D组显著低于A、B组（P < 0.05），D组显著高于C组（P < 0.05）。D组BMSCs以1∶10和1∶20比例与胰岛缺氧再给氧共培养后，代谢活性显著高于C组（P < 0.05）。A、B、C、D组胰岛凋亡率分别为27.1% ± 3.2%、24.0% ± 1.0%、64.3% ± 1.8%、46.2% ± 1.4%，C、D组显著高于A、B组（P < 0.05），但D组显著低于C组（P < 0.05）。各时间点A、B组SI比较差异均无统计学意义（P > 0.05），C组显著低于A、B组（P < 0.05），在24 h和72 h时D组显著高于C组（P < 0.05）。 结论BMSCs对缺氧再给氧诱导的新生猪胰岛活性和功能损伤具有保护作用。