体外利用慢病毒介导BMP-2基因诱导兔滑膜间充质干细胞向软骨细胞分化
第一作者:符培亮
2013-09-17 点击量:631 我要说
符培亮 张雷 吴海山 吴宇黎 胡凯猛 丛锐军 陈松
【摘要】目的 使用慢病毒介导兔BMP-2基因转染兔滑膜间充质干细胞(SMSCs),检测其安全性,并在体外定向诱导至软骨细胞。方法 通过构建包含BMP-2基因的慢病毒载体,转染SMSCs后行安全性分析;各项检测和MicroRNA分析判断转染后的SMSCs是否进入软骨细胞分化谱系。结果 贴块法获得的SMSCs在经分离纯化后,表现出间充质干细胞应有的结构和表面标志物,具有多向分化潜能。增殖动力学、核型分析、致瘤型分析等证实被慢病毒转染的SMSCs安全。Western blot、免疫荧光等证实且能稳定表达BMP-2蛋白。14天后,免疫组化、MicroRNA检测等证实在不需外加外源性BMP-2的体外环境下SMSCs可自发向软骨细胞分化。结论 经重组慢病毒载体感染的兔SMSCs足够安全,能稳定表达BMP-2,体外能自发向软骨细胞分化。