赵艳红    杨强    彭江   郭全义   夏群   马信龙   徐宝山   赵斌   张莉   伍耀宏   刘越    许文静   卢世璧

摘要:   目的对新型脱细胞骨基质材料（acellular bone matrix，ACBM）的组织学结构及细胞相容性进行观察，探讨其作为组织工程骨支架的可行性。 方法取健康18～24月龄雄性杂种犬股骨头负重区骨柱，高压水枪冲洗、脱脂，Trixon X-100、脱氧胆酸钠等进行脱细胞等理化处理，制备新型ACBM支架；对其行扫描电镜观察，HE染色、天狼星红染色及Hoechst 33258染色，评估其脱细胞程度及结构。采用密度梯度离心法分离培养犬BMSCs，取第3代BMSCs种植至ACBM支架上，MTT法分析支架浸提液毒性；复合培养3 d行倒置显微镜、扫描电镜、活/死细胞荧光染色、组织学等观察细胞在支架的生长、分化情况。 结果HE染色示ACBM支架去细胞彻底，无细胞碎片残留；天狼星红染色示支架呈深红及黄红相间染色；Hoechst 33258染色未见细胞残留。扫描电镜观察示ACBM支架内孔洞相互贯通，具有天然骨的孔径和孔隙率。MTT法检测示，培养1～6 d不同浓度（25%、50%、100%）支架浸提液与对照H-DMEM培养液吸光度（A）值比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。倒置显微镜、扫描电镜、组织学观察结果均显示细胞在支架上黏附良好，增殖显著，细胞基质分泌增加；活/死细胞染色示ACBM支架内细胞均呈绿色。 结论ACBM支架去细胞彻底，具备良好的孔径和孔隙率，无毒，细胞相容性良好，可作为良好的支架载体用于组织工程骨的构建。