孟繁钢     何爱珊    张志奇   吴刚    杨子波    林子洪   龙毅   廖威明 

 【摘要】目的   观察比较不同浓度重组人BMP-7对骨髓间充质干细胞复合组织工程支架材料TCP-COL体外构建组织工程软骨的影响。方法   用梯度离心法获取人骨髓间充质干细胞（hMSCs），将扩增的第3代hMSCs以1×107/ ml的细胞浓度接种在支架材料TCP-COL上，分为三组进行培养：对照组（成软骨诱导液培养），BMP-7(50)组（成软骨诱导液基础上加入50ng/ml的BMP-7），BMP-7(100)组（成软骨诱导液基础上加入100 ng/ ml的BMP-7）。培养2周后进行扫描电镜观察（SEM），苏木素伊红染色（HE），阿尔新蓝染色，Ⅱ型胶原免疫组织化学染色（IHC）,荧光定量PCR（RT-PCR），糖胺多糖定量（GAG quantification assay）研究。 结果   扫描电镜与苏木素伊红染色结果显示细胞在TCP-COL生物支架中分布均匀且紧密粘附在材料表面。阿尔新蓝染色，Ⅱ型胶原免疫组织化学染色，二型胶原（F = 76.931, P < 0.05）, 糖胺多糖（F = 63.158, P < 0.05）荧光定量PCR，糖胺多糖定量(F = 8.981, P < 0.05)结果显示BMP-7能有效促进人骨髓间充质干细胞复合支架材料TCP-COL体外成软骨，且100mg/ml的浓度应用效果大于50 mg/ ml。但在COL1基因的表达上，BMP-7(50)组和BMP-7(100)组都显著大于对照组（F = 34.823, P < 0.05）。 结论   BMP-7能有效促进人骨髓间充质干细胞复合支架材料TCP-COL体外成软骨，且100mg/ml的浓度应用效果大于50 mg/ ml，但应注意其促进骨质增生的作用。TCP-COL是一种有应用前景的生物支架材料。