曹德军 权正学 蒋电明 罗小辑 钟伟洋 刘港

【摘 要】 目的 研究人BMP-4 腺病毒表达载体（adenovirus human BMP-4，Ad-hBMP-4）转染体外培养人退变腰椎间盘细胞后，对细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原及Sox9 表达的影响。 方法 取Ad-hBMP-4 重组腺病毒进行扩增，并检测病毒滴度。取Modic Ⅲ级、27 ～ 50 岁腰椎间盘突出症患者自愿捐赠的退变椎间盘体外分离、培养椎间盘细胞，激光共聚焦显微镜观察Ⅱ型胶原在细胞中的表达。取第1 代椎间盘细胞转染Ad-hBMP-4 重组腺病毒（实验组），应用RT-PCR 和Western blot 法分别检测病毒转染后3、6 d 细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原、Sox9 基因及蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白的表达，与未转染细胞（对照组）进行比较。 结果 Ad-hBMP-4 重组腺病毒滴度为5 × 106 PFU/mL。激光共聚焦显微镜观察示Ⅱ型胶原主要表达于椎间盘细胞质。Ad-hBMP-4 重组腺病毒转染后细胞形态无明显变化。转染3、6 d 后实验组蛋白多糖、Ⅱ型胶原、Sox9 mRNA 表达以及蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白表达均显著高于对照组，比较差异有统计学意义（P < 0.05）；实验组各指标3、6 d 间比较差异亦有统计学意义（P < 0.05）。 结论 Ad-hBMP-4 可有效转染体外培养人退变椎间盘细胞，促进细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原及Sox9 表达，提示hBMP-4 可能对早期退变的椎间盘具有修复功能。