神经生长相关蛋白43 在大鼠椎间盘炎性模型中的表达及意义

第一作者:张宏军

2013-01-09   我要说

张宏军     范顺武

【摘 要】 目的 探讨椎间盘炎性环境下大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)和椎间盘组织中神经生长相关蛋白43(growth-associated protein 43,GAP-43)的表达及意义。 方法 正常成年雄性SD 大鼠103 只,体重200 ~ 250 g,随机分为实验组(n=48)、对照组(n=48)和空白对照组(n=7)。于大鼠L5、6 椎间盘内注入荧光金(fluorogold,F-G)作为追踪剂;实验组和对照组于注入F-G 7 d 后分别注射50 μL 弗氏佐剂(制备椎间盘炎性模型)和生理盐水,空白对照组不作进一步处理。实验组及对照组于弗氏佐剂注射后1、3、7、14 d 分别取出T13 ~ L6 DRG 和L5、6 椎间盘,行GAP-43 的荧光免疫组织化学染色、原位杂交和RT-PCR 检测。空白对照组于F-G 注入后8 d 取材作以上检测。 结果 荧光免疫组织化学染色示:实验组DRG 中F-G 标记的GAP-43 阳性细胞表达在术后3 d 时显著高于对照组(P <0.05),其余时间点差异无统计学意义(P > 0.05);实验组和对照组各时间点F-G 标记的GAP-43 阳性细胞横截面积比较,差异均无统计学意义(P > 0.05);术后3 d GAP-43 阳性细胞和钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)、异凝集素B4(isolectin B4,IB4)双染表达显示,对照组和实验组CGRP 的表达分别为91.4% ± 7.4% 和87.6% ± 7.8%,差异无统计学意义(P > 0.05),两组均无IB4 表达;椎间盘中实验组GAP-43 阳性神经纤维表达明显高于对照组(P < 0.05),但CGRP 阳性神经纤维表达比较差异无统计学意义(P > 0.05),两组均无IB4 表达。原位杂交实验和RT-PCR 检测显示:除术后1 d 实验组GAP-43 mRNA 阳性细胞百分比及相对表达量显著高于对照组(P < 0.05)外,其余时间点比较差异均无统计学意义(P > 0.05)。 结论 椎间盘内炎性环境刺激了大鼠DRG 中GAP-43 的高表达,促使中、小神经纤维长入病变椎间盘。

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