崔晓栋   官秀梅   张晓芸   李宏    李鑫    王建英   成敏

摘要： 目的 探讨细胞骨架F-actin在层流剪切应力促内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）向内皮分化中的作用。方法 对大鼠骨髓来源的EPCs施以层流剪切应力（1.2 Pa），以荧光定量RT-PCR及流式细胞术检测特异性内皮细胞标记分子vWF、CD31 mRNA及蛋白的表达来反映EPCs分化程度；以免疫荧光染色观测F-actin的排列情况；应用Ras GTPase Pull-Down方法检测Ras活性。结果 层流剪切力处理后，EPCs 分化标记vWF及CD31的基因及蛋白表达较静止组明显升高（P<0.05），细胞骨架F-actin发生重排，Ras活性明显增高。细胞骨架稳定剂Jasplakinolide（JAS）及细胞骨架松弛剂Cytochalasin D（CytoD）预处理均不同程度地抑制了层流剪切应力所致的细胞骨架的重排、Ras 活性的上调及EPCs分化效应（P<0.05），而过表达Ras则对层流剪切应力诱导的EPCs分化有明显促进作用（P<0.05）。结论 一定大小的层流剪切应力可促进EPCs向内皮细胞分化，其机制可能与层流剪切应力重塑细胞骨架F-actin，进而影响Ras活性有关；这对于揭示受损血管内皮修复的具体机制、阐明动脉粥样硬化等心血管疾病的发病机理及临床防治此类疾病具有一定的意义。