强辉  张晨  时志斌   凌鸣

目的 探讨表达VEGF 的重组腺相关病毒（recombinant adeno-associated virus，rAAV）对大鼠创伤性脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）的保护作用及其机制。 方法 取144 只成年雄性SD 大鼠（体重200 ～ 250 g）随机分为4 组， 每组36 只。假手术组（A 组）仅手术暴露脊髓。模型对照组（B 组）、rAAV- 绿色荧光蛋白（green fl uorescent protein，GFP）组（C 组）、rAAV-hVEGF165-GFP 组（D 组）制备创伤性SCI 大鼠模型，术后即刻分别予以20 μL 生理盐水、rAAV-GFP 病毒、rAAV-hVEGF165-GFP 病毒脊髓注射治疗。术后3、7 d 采用BBB 评分观察大鼠后肢运动功能变化；术后7 d 通过脊髓组织尼氏小体染色观察脊髓组织病理学变化，脊髓组织神经元透射电镜检测及TUNEL 凋亡细胞染色观察脊髓神经元凋亡，Western blot 检测水通道蛋白4（aquaporin 4，AQP-4）表达；术后1、3、5、7 d ELISA 法检测VEGF165 蛋白表达。 结果 BBB 评分显示术后3、7 d D 组神经功能较B、C 组显著改善（P < 0.05）。尼氏小体染色显示术后7 d D 组脊髓组织结构破坏明显轻于B、C 组（P < 0.05）。ELISA 检测显示D 组VEGF165 蛋白表达呈低剂量缓释表达，术后3、5、7 d，D 组VEGF165 蛋白表达均高于其他3 组（P < 0.05）。透射电镜检测及TUNEL 凋亡细胞染色结果显示术后7 d D 组脊髓神经元凋亡较B、C 组显著减少，凋亡率显著低于B、C 组（P < 0.05）。Western blot 结果显示术后7 d D 组脊髓组织AQP-4 蛋白表达明显较B、C 组减少（P < 0.05）。 结论 表达VEGF 的rAAV 通过抗神经元凋亡及减轻脊髓水肿对大鼠创伤性SCI 起保护作用。