权 鑫  叶正旭  王宇清  罗卓荆

【摘要】 目的：利用脊髓背根神经节神经元细胞体外机械压力损伤模型，探计单纯机械压力因素对背根神经节神经元细胞的损伤效应，尤其是细胞膜骨架蛋白的变化情况。方法：新生SD大鼠脊髓背根神经节神经元体外原代培养，利用多功能全自动细胞压力仪（国家实用新型专利ZL 200820030390.7），将培养细胞分为A、B、C、D四组，其中A组为未施加机械压力损伤的对照组，B、C、D组分别给予0.3mPa、0.5mPa.、0.7mPa的压力损伤10min，每组观察细胞爬片6个，于加压后培养8h取细胞爬片固定，送原子力显微镜检测，观察神经元细胞的细胞膜骨架蛋白纳米级变化情况，获取并分析胞膜表面颗粒高度分布数据及原子力显微镜图片。结果：对照组细胞膜表面平滑，无明显粗糙颗粒；0.3mPa组细胞膜表面颗粒突起较对照组增多，膜颗粒总体高度增加，局部变粗糙，胞膜上蛋白高度分布直方图峰值右移；0.5mPa组较0.3mPa组胞膜粗糙度更加明显；0.7mPa组膜表面蛋白颗粒总体高度较0.3mPa及0.5mPa组降低，粗糙颗粒减少，但出现胞膜骨架蛋白解聚与构像变化，胞膜出现孔道样改变。胞膜颗粒高度分布峰值、分布宽度及最高颗粒值的单因素方差分析显示，压力损伤各组间及损伤组与对照组均有统计学差异（P＜0.01）。结论：机械压力损伤因素可引起细胞膜骨架蛋白变化和表面颗粒高度变化，为压力损伤的细胞保护研究提供了实验数据。