魏梅洋 董艳 庄颜峰 王万明

【摘要】 目的 研究脂质体介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)和胶质细胞生长因子2(glial growth factor 2, GGF2)的双基因真核表达载体在脊髓内转染及其表达变化。方法 构建GGF2与EGFP双基因真核表达载体pIRES2 EGFP GGF2。采用注射法将阳离子脂质体和pIRES2 EGFP GGF2质粒混合后转染至大鼠胸段脊髓组织中。采用RT PCR法检测不同时间点转染区域脊髓组织中GGF2 mRNA的表达。在荧光显微镜下观察不同时间点EGFP在大鼠脊髓中的表达。 结果 基因转染后2 d即可观察到EGFP的表达及GGF2 mRNA表达的增加，在基因转染后1～2周内EGFP及GGF2 mRNA呈高水平表达，基因转染4周后，EGFP及GGF2 mRNA的表达明显减少。 结论 脂质体介导pIRES2 EGFP GGF2转染大鼠脊髓后其表达的特点有助于基因治疗效果的即刻性，即早期大量表达，起到基因治疗的作用，又可避免外源基因的持续表达。