叶亚平 李觅 吴颖星 黄俊明 印卫锋 郭风劲

目的 探讨溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid,LPA）调控脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ASCs）增殖的作用及其分子机制。

方法 分离SD大鼠ASCs，利用LPA对其进行干预，干预时间为1h，采用Western Blot检测YES相关蛋白（yes associated protein,YAP）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）蛋白表达水平。利用免疫荧光检测YAP亚细胞定位，逆转录聚合酶链反应

（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）检测CTGF和Ankrd1的mRNA表达水平。慢病毒转染ASCs，Western Blot检测不同分组YAP蛋白表达。进一步利用流式细胞术和CCK-8法检测不同分组中ASCs增殖情况。最后采用RhoA抑制剂C3干预，免疫荧光检测不同分组中YAP亚细胞定位，Western Blot检测YAP、CTGF和GTP-RhoA的表达情况。

结果 LPA能显著促进YAP的表达和在细胞核内的聚集，同时LPA也能够促进YAP靶基因CTGF在蛋白水平的表达。LPA能上调YAP靶基因CTGF和锚蛋白重复域1（ankyrin repeating domain 1,Ankrd1）的mRNA表达水平。慢病毒转染敲除YAP表达后，LPA对YAP的上调作用被明显抑制。细胞周期流式细胞术和CCK-8检测结果显示LPA可显著促进ASCs的增殖，但在shYAP慢病毒转染特异性敲除YAP后，LPA对ASCs的促增殖能力被明显削弱。RhoA抑制剂C3处理后，LPA对YAP细胞核聚集的促进作用被削弱，同时LPA对YAP、CTGF和GTP-RhoA表达的促进作用也得到了明显抑制。

结论 LPA能够通过RhoA-YAP通路调控ASCs的增殖。