Yes 相关蛋白通过 Wnt/β⁃catenin 信号通路调控软骨细胞 Sox9 表达的研究
第一作者:鲍远
2016-12-23 点击量:982 我要说
鲍远 黄俊明 吴颖星 陈琨 程鹏 郭风劲 陈安民
目的 研究Yes相关蛋白(Yes-associatedprotein,YAP)通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9表达的机制。
方法 用siRNA分别沉默YAP基因和Lats1基因来调控YAP的活性,通过Real-timePCR检测软骨特异性基因和Wnt/β-catenin信号通路下游基因的表达;通过WesternBlot检测GSK3β的磷酸化水平、活化β-catenin 的蛋白水平以及Sox9的蛋白水平;并通过阿利新蓝染色检测软骨细胞外基质的分泌情况。用siRNA沉默YAP基因后,再用氯化锂干预细胞,通过WesternBlot检测Sox9的表达和GSK3β的磷酸化水平。
结果 沉默YAP基因后,磷酸化GSK3β和活化β-catenin的蛋白水平减少,c-Myc和Nanog基因表达减少,Sox9、Col2和Aggrecan基因表达升高,并且软骨细胞分泌基质增多;沉默Lats1基因后,磷酸化GSK3β和活化β-catenin的蛋白水平增加,c-Myc和Nanog基因表达上调,Sox9、Col2和Aggrecan基因表达减少,并且软骨细胞分泌基质减少。此外,氯化锂可以阻断沉默YAP引起的Sox9表达上调。结论YAP通过 Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9的表达。