张同星  井万里  张涛  姜文学  高中玉  许财元  张辉

目的 观察神经调节素-1β（neuregulin-1β，NRG-1β）对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后脊髓组织基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）表达的影响，并初步探讨其作用与机制。

方法 48只SD大鼠随机分为对照组（n=16）、缺血再灌注组（模型组，n=16）、NRG-1β治疗组（n=16），对照组仅分离暴露腹主动脉，其余两组采用腹主动脉阻断法制备动物模型。治疗组在打开动脉夹后立即经尾静脉注射NRG-1β（10μg/kg），缺血再灌注模型组在打开动脉夹后立即经尾静脉注射等量的0.1mol/L的PBS缓冲液。于取材前3min根据改良Tarlov评分标准进行神经功能评分。分别于术后3h、6h、12h、24h取材（每个时间点4只），HE染色观察脊髓病理变化，免疫组化和Real-time PCR分别检测MMP-9、TIMP-1蛋白和mRNA水平的表达。

结果 模型组在术后各时间点的Tarlov评分较对照组显著下降（P＜0.05），治疗组在术后6h、12h、24h的Tarlov评分较模型组显著增高（P＜0.05）。HE染色显示模型组和治疗组均存在脊髓组织损伤，但治疗组较模型组减轻。免疫组化结果显示，对照组未见MMP-9、TIMP-1阳性表达细胞；模型组MMP-9免疫阳性细胞数（个/高倍视野）在术后3h、6h、12h、24h分别为9.00±1.63、23.80±1.71、28.30±1.50、34.80±2.63，治疗组分别为8.50±0.58、17.80±0.96、20.80±3.50、30.00±2.16，其中6h、12h、24h治疗组与模型组相比阳性细胞数明显减少（P＜0.05）。模型组TIMP-1免疫阳性细胞数（个/高倍视野）在术后3h、6h、12h、24h分别为11.80±0.96、12.30±1.50、7.80±0.96、7.80±1.50，治疗组分别为12.30±0.96、13.80±0.96、10.50±1.73、10.30±0.96，其中12h、24h治疗组与模型组相比阳性细胞数明显增多（P＜0.05）。对照组MMP-9在术后3h、6h、12h、24h的mRNA表达量分别为4.93±0.21、4.95±0.24、4.96±0.25、4.98±0.23，模型组分别为5.38±0.25、6.53±0.31、6.87±0.29、7.53±0.33，治疗组分别为5.35±0.26、5.56±0.22、5.74±0.27、5.90±0.31，其中6h、12h、24h模型组与对照组比较MMP-9的mRNA表达量明显增加（P＜0.05），6h、12h、24h治疗组MMP-9的mRNA表达量较模型组明显减少（P＜0.05）。对照组TIMP-1在术后3h、6h、12h、24h的mRNA表达量分别为4.74±0.23、4.76±0.21、4.73±0.25、4.76±0.24，模型组分别为4.53±0.32、4.62±0.21、3.83±0.20、3.65±0.32，治疗组分别为4.55±0.26、4.65±0.27、4.28±0.22、4.25±0.24，其中12h、24h模型组与对照组比较TIMP-1的mRNA表达量明显减少（P＜0.05），12h、24h治疗组TIMP-1的mRNA表达量较模型组明显增加（P＜0.05）。

结论 神经调节素可在大鼠脊髓缺血再灌注损伤过程中发挥神经保护作用，该作用的实现可能与MMP-9的表达下调和TIMP-1的表达上调有关。