韩成龙  姜超

摘要：目的  观察模拟微重力条件下体外转化生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）诱导骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMMSCs） 向髓核样细胞表型分化的效果。方法  取成年兔骨髓间充质干细胞分离培养并增殖至第3代后建立3个培养组：微重力诱导培养组（A组），将经TGF-β1转染后的BMMSCs在藻酸钙凝胶微球及旋转式细胞培养系统内进行模拟微重力条件下动态培养；诱导培养组（B组），将经TGF-β1转染后的BMMSCs在藻酸钙凝胶微球内培养；模拟微重力自然分化组（C组），将BMMSCs在藻酸钙凝胶微球内置于旋转式细胞培养系统内培养。在培养的第3、7、14、21天分别检测以上各组BMMSCs中TGF-β1的含量变化及BMMSCs的增殖能力，应用免疫组化、甲苯胺蓝染色检测各组Ⅱ型胶原表达情况，采用RT-PCR法检测各组BMMSCs的蛋白聚糖及Ⅱ型胶原蛋白mRNA的表达。结果  培养至第14天，A、B组中已可观察到呈多角形的类髓核样细胞，C组呈不规则形。从第3天开始，上清液中TGF-β1的含量和BMMSCs中DNA的含量A组较B、C两组明显增高（P<0.05），且随时间的延长而逐渐增高。A组在免疫组化染色中可见Ⅱ型胶原蛋白染色阳性， B组呈弱阳性，C组无明显变化。RT-PCR结果显示A、B组的BMMSCs中已有蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白mRNA的表达。结论  模拟微重力条件下TGF-β1转染的BMMSCs在一定时间内可增加合成蛋白聚糖及Ⅱ型胶原蛋白的能力。