张铭华  张施洋  赵增辉  李维朝  蒋电明

目的 探讨盐酸氨基葡萄糖（glucosamine-hydrochloride，Glu/Ch）对关节内出血引起的软骨损伤（blood-induced joint damage，BJD）修复作用。

方法 取健康成年新西兰大白兔32只，随机分为高剂量Glu/Ch组（A组）、低剂量Glu/Ch组（B组）、阳性对照组（C组）、阴性对照组（D组），每组8只。A、B、C组制备关节内出血模型，D组不建模。建模后第1天开始A、B组每天以Glu/Ch灌胃（剂量分别为250、21.5 mg/kg）8周，C、D组以生理盐水灌胃8周。建模后3、7 d及2、8周检测关节损伤标志物血清软骨寡聚基质蛋白、血清硫酸软骨素846、尿Ⅱ型胶原羧基端前肽（C-terminal telopepide of typeⅡcollagen，CTX-Ⅱ）浓度。8周时处死动物，抽取关节液采用ELISA法检测炎性因子IL-1β、TNF-α浓度。取关节软骨组织分别行免疫组织化学染色，测量基质金属蛋白酶13（matrix metalloproteinase 13，MMP-13）表达量；行阿尔新蓝、番红O染色，计算阳性染色面积百分比；对关节软骨中的蛋白多糖含量行半定量检测。

结果 建模后3 d A、B、C组COMP浓度显著高于D组（P<0.05），B、C组高于A（P<0.05）；7 d A、B、D组间比较差异无统计学意义（P>0.05），且均低于C组（P<0.05）；2、8周各组间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。各时间点各组间CS846浓度比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。各时间点A、B、C组CTX-Ⅱ浓度均显著高于D组（P<0.05）；除3 d外，7 d及2、8周时，A组CTX-Ⅱ浓度显著低于B、C组（P<0.05）。建模后8周，A、B组TNF-α浓度显著高于D组、低于C组（P<0.05）；A、B组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。A、B、D组IL-1β浓度显著低于C组（P<0.05），A、D组低于B组（P<0.05），A、D组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组织化学染色示，C组MMP-13表达量显著高于A、B、D组，A、B组高于D组（P<0.05），A、B组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。各组均见阿尔新蓝及番红O阳性染色，其中D组染色范围最大、着色最深，其次分别为A、B、C组；两种阳性染色面积百分比各组间比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。各组关节软骨蛋白多糖相对含量由低到高依次为C、B、A、D组，各组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。

结论 兔关节出血模型会引起关节软骨代谢异常和滑膜炎性反应，每天给予Glu/Ch 250 mg/kg灌胃能在一定程度上阻止BJD，其作用机制可能是减少炎性反应引起的关节损伤，下调IL-1β、TNF-α、MMP-13，增加蛋白聚糖合成。