胡腾龙  厉晓杰  赵雄  陆清达  郝旭光  张斌  杨柳  颉强

目的 探讨多孔块体生物玻璃在体外环境中对成骨细胞黏附、增殖及分化的影响。

方法 多孔块状生物玻璃浸泡于α-MEM培养基中制备浸提液,采用电感耦合等离子体原子发射光谱仪检测生物玻璃培养基及α-MEM培养基中的离子浓度。通过Giemsa染色、黏着斑蛋白（Venculin）免疫荧光染色检测生物玻璃培养基培养的MC3T3-E1细胞（生物玻璃培养基组）及α-MEM培养基培养的MC3T3-E1细胞（普通培养基组）的细胞个数、核质比、Venculin免疫荧光强度;通过细胞周期检测、MTT检测、Brdu检测比较两组细胞的各个细胞周期数量构成比、OD值、Brdu阳性细胞比;提取两组细胞总RNA并行成骨相关基因碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白分析,经碱性磷酸酶染色和茜素红染色观察两组培养基培养细胞的碱性磷酸酶活性率及细胞矿化率。

结果 生物玻璃培养基中的Si离子和F离子浓度分别为（40.02±0.67） mg/L、（0.02±0.001） mg/L,α-MEM培养基分别为（2.02±0.01） mg/L、0.00 mg/L。Giemsa染色后生物玻璃培养基组和普通培养基组400倍镜下的细胞个数分别为（106.0±6.025）个、（40.20±3.639）个,差异有统计学意义;免疫荧光染色结果显示生物玻璃培养基组细胞的核质比、Venculin免疫荧光强度（分别为40.85±5.720、0.050 88±0.021 78）较普通培养基组（分别为21.93±4.137、0.023 60±0.003 18）增高。生物玻璃培养基组处于S期和G2/M期细胞数量构成比较普通培养基组高。生物玻璃培养基组OD值至第3天开始较普通培养基组增高,BrdU阳性细胞比较普通培养基组增高。生物玻璃培养基组细胞碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原的表达较普通培养基组增多,碱性磷酸酶活性率（1.328%±0.015 36%）高于普通培养基组（0.979%±0.030 59%）,细胞矿化率（2.953%±0.536 3%）高于普通培养基组（1.000%±0.208 1%）。

结论 多孔块体生物玻璃培养基相对于α-MEM培养基含有较多的Si离子,能促进MC3T3-E1细胞黏附,并对其增殖、活力及成骨分化都具有明显的促进作用,具有较好的生物活性。