张正政  王少杰  齐岩松  张继英  江东  余家阔

目的: 探讨半月板纤维软骨细胞(MFCs)接种脱钙松质骨(DCB)支架的最佳接种方法。

方法: 实验分静滴法、注射法、离心法、负压法等4组。取兔MFCs,采用上述4种方法对孔隙率为80%、平均孔径为268μm的DCB支架进行细胞接种。Live/Dead染色检测其细胞活性,并通过软件分析其细胞分布情况。CCK-8法和Hoechst 33258法检测支架内MFCs增殖情况和支架内DNA含量。

结果: 通过Live/Dead染色显示,离心法接种细胞后其存活率优于其他3组(P<0.05);细胞分布均匀,由浅至深各层细胞比例无明显统计学差异(P>0.05);1~5天细胞增殖能力优于其他3组(P<0.05),14~21天支架DNA含量亦优于其他3组(P<0.05)。

结论: 离心法可以明显提高MFCs在DCB上的细胞分布和细胞增殖能力,是一种简单、高效的,利于组织工程半月板(TEM)构建的接种方法。