王欢  方煌  李潇  高书涛  周传坤  邹银双  李锋

目的 探索人诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSCs）的无饲养层培养方法，并对此方法培养的iPSCs进行鉴定。

方法  将人iPSCs接种于玻璃粘连蛋白（Vitronectin XF）包被的培养皿上培养，采用EDTA消化传代。倒置显微镜下观察iPSCs的生长状态；碱性磷酸酶（ALP）染色鉴定；采用PCR和免疫荧光检测iPSCs多能性基因SSEA⁃1、Nanog、Sox2的表达情况。

结果 倒置显微镜下可见iPSCs呈典型的克隆状生长，克隆呈圆形或椭圆形，边界清晰、整齐；ALP染色结果阳性；PCR结果显示人iPSCs强表达多能性基因SSEA⁃1、Nanog、Sox2；免疫荧光结果显示多能干细胞特异性指标SSEA⁃1、Nanog、Sox2均呈阳性。

结论 无饲养层培养体系培养人iPSCs，细胞能稳定增殖，保持自我更新潜能及多能性。