杨匡  李海音  张伟  路康  周跃  李长青

目的：比较不同退变程度人椎间盘髓核组织中3种1-磷酸鞘氨醇受体（S1PR1/2/3）表达水平的差异，探讨椎间盘中S1PR表达水平与椎间盘退变的关系。

方法：收集腰椎间盘退行性病变患者手术切除的椎间盘组织，其中轻度退变（Pfirrmann分级Ⅳ级）22例，严重退变（Pfirrmann分级Ⅴ级）14例；同时取6例无椎间盘退变患者（单纯腰椎椎体骨折，Pfirrmann分级Ⅱ级）手术切除的椎间盘组织作为对照组；通过HE染色以及Saf-O染色观察不同退变程度椎间盘的组织学变化，免疫组化检测不同退变程度组织中的S1PR表达水平；Ⅱ型胶原酶消化分离提取原代髓核细胞，通过Real-time PCR、Western-bolt检测不同退变程度椎间盘髓核细胞中S1PR的表达水平，并通过细胞免疫化学方法对S1PR进行定位。

结果：HE染色及Saf-O染色结果显示退变椎间盘的纤维环出现破损，髓核细胞形成明显的集落，细胞外基质减少。免疫组化结果显示正常和轻度退变的髓核组织中3种受体（S1PR1/2/3）都有表达，严重退变的组织中表达极弱；Real-time PCR结果显示对照组髓核细胞中 S1PR1/2/3 的mRNA表达水平分别是严重退变组的5.34±0.52倍、7.25±0.04倍、1.92±0.06倍，轻度退变组S1PR1/2/3 的mRNA表达水平分别是严重退变组的4.35±2.45倍、4.96±3.44倍、2.19±0.82倍；Western-blot发现对照组和轻度退变组髓核细胞中S1PR1/2/3均有表达，严重退变组表达水平较低；免疫细胞化学显示S1PR主要集中在髓核细胞的细胞质和细胞膜上。

结论：髓核组织中主要表达S1PR1/2/3，在严重退变的髓核组织和细胞中其表达水平明显下降，S1P及其受体可能参与椎间盘髓核组织的退变过程。