丁道芳  庞坚  杜国庆  郭海玲  秦梦  曹月龙  詹红生  郑昱新

目的: 体外培养大鼠的股骨头并诱导其快速退变,为药物筛选和治疗提供可靠的软骨退变模型。

方法: 取2周龄SD幼鼠的股骨头,每只左右股骨头对应为对照组和实验组,分别培养于正常培养基和诱导培养基中(含50ng/ml的TNFa),每隔48 h换一次培养液,至第5 d,取出股骨头,固定于4%多聚甲醛,经过脱钙和脱水,石蜡包埋,切片后经甲苯胺蓝和臧红-固绿染色及细胞免疫荧光检测Ⅱ型胶原、MMP13、Sox9、ADAMTS5等基因的表达。

结果: 在诱导培养基中培养5 d的股骨头外缘,相对于正常培养基中培养的股骨头外缘,甲苯胺蓝和臧红染色明显淡染,固绿深染,提示软骨退变。进一步免疫荧光检测软骨标志基因Ⅱ型胶原和Sox9表达减弱,促软骨退变基因MMP13和ADAMTS5表达增强。且经过诱导培养的股骨头的整体大小明显小于正常培养的股骨头。

结论: 体外培养大鼠股骨头快速诱导其退变,建立软骨退变的体外模型。