闫钧  赵彦涛  张京  吴琛  陈静园  张玉梅  

目的：探索采用非病毒方法转染骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSC)膜片的可行性;antimi R-138转染的BMSC膜片促进同种冻干骨粉(FDB)成骨的可行性。

方法：采用Vc连续诱导法培养BMSC膜片,通过调整Lipofectamine 2000-mi RNAs载体复合物的用量及转染步骤对BMSC膜片进行转染;采用荧光体式及显微观察、mi RNA-PCR方法比较各组的转染效率的差异;通过大体观察、HE染色和扫描电镜观察BMSC膜片的形态。将BMSC膜片/FDB复合物移植到裸鼠皮下,术后4~8周,分别采用HE和MT染色对膜片的成骨能力进行评估。

结果：荧光体式及显微结果表明antimi R-138可成功地转至BMSC膜片中,其中150 n M组对内源性mi R-138的抑制率为85%;体内异位成骨实验表明antimi R-138转染的BMSC膜片可显著促进并加速移植复合物的骨组织形成。

结论：(1)通过对以Lipofectamine 2000为载体的转染复合物的用量及转染步骤进行优化,可以构建出具有较高转染效率,良好的细胞相容性以及结构完整的antimi R-138修饰的BMSC膜片。(2)antimi R-138转染的BMSC膜片可显著促进并加速移植复合物的异位骨组织形成。