孙立国  范宏斌  李宏国  屈玲  仓宝成  薛英森  刘鑫成  李丹  

目的：评价三相蚕丝组织工程韧带的理化性质及生物相容性。

方法：编织蚕丝网状支架,提取丝素蛋白,利用硫酸软骨素、透明质酸钠、羟基磷灰石(HA)及丝素蛋白修饰三相支架,测定支架材料形貌及表面元素。支架材料接种骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)后利用扫描电镜(SEM)、激光共聚焦显微镜,观察细胞的黏附及增殖情况。

结果：蚕丝去除丝胶后,表面变光滑,脱丝胶前蚕丝纤维的直径为(9.89±1.98)μm,脱丝胶后大小为(9.14±1.75)μm,表面经脱丝胶处理后蚕丝纤维直径没有显著改变(P=0.221)。表面元素分析表明B区中的S和Na元素及C区中的Ca元素比A区有显著提高,并且材料的孔径在60~80μm。A、B、C区的细胞在培养后4 h与培养后2 h相比,细胞黏附率分别为:A区(83.2±3.4)%,B区(81.8±2.8)%,C区(71.1±5.4)%,差异有统计学意义(P=0.0001),表明细胞培养后4 h大部分细胞在材料上有较好的黏附。扫描电镜观察,接种后1天,BMSCs在材料上黏附良好,接种后7天细胞爬满材料表面并可见细胞伪足深入材料内部生长。活/死细胞染色利用激光共聚焦显微镜观察培养的7天比1天的细胞增殖明显,且未见明显死亡,细胞在材料的多个层次可见。

结论：构建的三相蚕丝组织工程韧带具有良好的生物相容性,利于BMSCs的黏附增殖。