厉晓杰  杨柳  刘建  罗卓荆  

目的：探讨绝经后骨质疏松破骨细胞中Hedgehog信号的活性及其对破骨细胞的作用,了解雌激素与Hedgehog信号的关系。

方法：利用绝经后骨质疏松模型(OVX,Ovariotomized)小鼠3只与假手术组小鼠3只来源的破骨细胞进行培养,对比两组细胞Hedgehog信号的活性。将RAW264.7细胞用无酚红培养基进行破骨诱导培养,并随机分为6组:雌激素组,给予雌二醇以10-8 M浓度干预;雌激素+激动剂组,给予10-8 M浓度雌二醇和1μm浓度的Hedgehog信号激动剂Purmorphamine进行干预;雌激素+拮抗剂组,给予10-8 M浓度雌二醇和1μm浓度的Hedgehog信号拮抗剂Vismdegib进行干预;对照组,不给予任何干预;激动剂组,给予1μm浓度的Purmorphamine进行干预;拮抗剂组,给予1μm浓度的Vismdegib进行干预,定量PCR检测各组Hedgehog信号水平Gli1和Ptch1的表达。对雌激素组、拮抗剂组和对照组分别进行TRAP染色和F-actin染色,以检测破骨细胞数量。

结果：(1)与正常小鼠来源的破骨细胞相比,OVX小鼠来源的破骨细胞中Ptch1 Gli1和Ptch1 Gli1表达量0.72400±0.04272、0.66794±0.07331水平更高于正常小鼠来源的量0.44196±0.06822、0.45229±0.05750,差异有统计学意义(P0.05);(2)Gli1 Ptch1表达量0.4131±0.02511、0.54165±0.03931较对照组1.00000±0.11771、0.74160±0.07632低,差异有统计学意义(P0.05);雌激素+激动剂组中Ptch1和Gli1表达水平0.38557±0.06785、1.00000±0.03138较激动剂组0.86403±0.05886、1.45856±0.05911低,差异有统计学意义(P0.01);(3)与对照组相比,拮抗剂组与雌激素组破骨细胞数量均较低(P0.05)。

结论：(1)绝经后骨质疏松破骨细胞中Hedgehog信号活性提高;(2)破骨细胞中雌激素对Hedgehog信号有抑制作用;(3)体外培养时,抑制Hedgehog信号能降低破骨细胞的数量,改善雌激素缺乏时破骨细胞过多的情况。