冀全博  徐小洁  张强  张立  徐亚梦  梁迎春  王涛  李玲  郭靖  叶棋浓  王岩  

目的：构建带Myc(p XJ-40)标签的CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding proteinα,C/EBPα)的真核表达载体,并检测其对骨肉瘤细胞生长的影响。

方法：应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术从人乳腺文库中扩增出C/EBPα全长编码区基因;将扩增基因克隆到Myc载体中,并将重组质粒转染人胚胎肾293T细胞;Western blotting检测表达情况;另将重组Myc-C/EBPα质粒转染人骨肉瘤细胞系U2OS(实验组)、Myc空载体质粒转染U2OS细胞(对照组),生长实验检测C/EBPα对肿瘤细胞生长的影响。

结果：成功构建Myc-C/EBPα真核表达质粒,重组质粒转染人胚胎肾293T细胞后成功表达。生长实验显示Myc-C/EBPα转染的U2OS细胞的生长明显受限,随着培养时间延长,受抑制的程度逐渐增大,培养至第5天,Myc-C/EBPα转染的实验组细胞生长抑制率为58%,且细胞的生长速率OD=0.495明显低于空白对照组1.179,差异有统计学意义(P0.01)。

结论：C/EBPα对骨肉瘤细胞的生长具有抑制作用。