赵伟  张连双  李红星  时彦  李雅娜

目的：探讨联合应用多聚腺嘌呤二核苷酸核糖聚合酶-1（PARP-1）抑制剂3-氨基苯甲酰胺（3-aminobenzamide，3-AB）和Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK对脊髓损伤大鼠神经细胞凋亡的影响。

方法：120只成年健康SD大鼠随机分为假手术组（A组）、模型组（B组）、PARP-1抑制剂组（C组）和联合用药组（D组），每组30只。以Allen′s打击法制备大鼠脊髓损伤模型，每组分别于造模后1d、3d、7d取5只大鼠行BBB评分，处死后利用免疫组化方法检测损伤部位脊髓内PARP-1、凋亡诱导因子（AIF）、Caspase-3及Bcl-2的表达；各时间点各组剩余大鼠处死后利用Western blotting检测PARP-1、Caspase-3蛋白表达水平，实时荧光定量PCR检测PARP-1、AIF、Caspase-3及Bcl-2的mRNA水平，采用原位末端标记（TUNEL）法检测神经细胞凋亡情况。

结果：造模后1d时B、C、D组大鼠BBB评分均为0分；3d时三组间的评分无统计学差异；7d时D组及C组明显高于B组，且D组最高（P＜0.05）。免疫组化及Western blotting结果显示，脊髓损伤后1~7d，B组脊髓组织中PARP-1、AIF及Caspase-3表达逐渐增强，Bcl-2表达逐渐减弱（P＜0.05）；与B组比较，D组及C组的PARP-1、AIF、Caspase-3表达均显著降低，且D组最低（P＜0.05）；而D组及C组的Bcl-2表达显著高于B组，且D组最高（P＜0.05）。实时荧光定量PCR检测各目的基因表达水平与其蛋白水平一致。TUNEL结果显示，B组脊髓损伤后3d凋亡细胞最多，7d时数量减少，但仍保持在较高水平（P＜0.05）；D组及C组凋亡细胞指数均显著低于B组，且D组最低（P＜0.05）。

结论：联合应用PARP-1抑制剂3-AB和Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK可有效抑制大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡，其机制可能与PARP-1、AIF、Caspase-3的表达抑制及Bcl-2的表达上调有关。