靶向沉默PPARγ基因对大鼠成骨和成脂分化的影响
2015-07-17 文章来源:傅德皓 冯晓波 杨述华 刘先哲 杨操 王晶 点击量:739 我要说
目的过氧化物酶体激活受体γ(PPARγ)被认为是脂肪形成的主要调节阀,但是PPARγ对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)成骨与成脂分化的影响报道较为少见,本文研究靶向沉默PPARγ基因对成骨和成脂分化的影响。方法在大鼠骨髓间充质干细胞利用短发夹RNA(shRNA)特异性序列靶向沉默PPARγ基因,并通过pSilencerTM2.1-U6载体转染大鼠BMSC,设实验组、阴性对照组及空白对照组,分别测定成脂及成骨相关基因。结果通过RT-PCR和Westernblot检测显示与性对照组及空白对照组比较,实验组成脂基因脂脂细胞分化因子和相关因子1(ADD1)和重组人ccaat/增强子结合蛋白α(C/ebpα)明显降低,而成骨基因胶原I(collagenI)和Cbfa1/Runx2在增加;BMSC成脂诱导14天后,油红O显示实验组较对照组成脂能力明显减弱,成骨诱导14天后,碱性磷酸酶测定及茜素红染色均证实实验组成骨能力增强。结论靶向沉默PPARγ基因下调大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化并促进成骨分化。