目的：通过构建携带针对microRNA-194 的shRNA载体及过表达载体，包装慢病毒，感染人骨肉瘤细胞系U2-OS，改变细胞内microRNA-194 基因的表达水平，研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响，为探索microRNA-194 作为骨肉瘤生物治疗的新靶点提供理论和实验依据。

　　方法：PCR扩增pri-miR-194及miR-194-5成熟体,克隆于慢病毒载体plent-i GFP中,转染大肠杆菌感受态细胞,收获并浓缩慢病毒颗粒,感染人骨肉瘤细胞系U2-OS。进行MTT，流式，平板克隆等试验。

　　结果：1.重组慢病毒表达质粒构建正确，过表达及抑制过表达重组慢病毒的滴度分别为1.5*108 TU/ml及4*108 TU/ml;2. microRNA-194过表达的人骨肉瘤细胞系U2-OS细胞增殖速度，凋亡率及细胞周期相较于其它实验组都有明显变化 (P<0.01)。

　　结论：成功构建了microRNA-194过表达及抑制过表达慢病毒表达载体; miR-194的表达水平对U2-OS细胞的增殖和凋亡造成显著影响。microRNA-194可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点，但该基因对骨肉瘤发生发展的作用及其机制尚待进一步研究。