MicroRNA-145 对骨肉瘤细胞生物学行为影响的体外实验研究

2015-04-27   文章来源:华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科 邵增务 范磊 张志才 刘建湘 吴强 杨述华    我要说

  目的:研究microRNA-145(miRNA-145)对于骨肉瘤细胞生物学行为包括细胞增殖、细胞周期、凋亡、粘附侵袭以及促血管形成能力的影响。

  方法:用脂质体法将miRNA-145模拟物瞬时转染入人骨肉瘤细胞(MG63)中,实验设置空白对照组、阴性对照转染组、miRNA-145转染组三组,转染后荧光显微镜下观察转染效率,实时荧光定量RT-PCR检测各组细胞miRNA-145的表达,蛋白质印迹法Western Blot检测各组细胞VEGF的表达,MTT增殖实验检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡率,细胞粘附实验检测各组细胞的粘附能力,Transwell细胞侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力,小管形成实验检测各组细胞的促进血管生成能力。

  结果:MiRNA-145转染组中miRNA-145的表达明显增高,VEGF的表达明显降低,有统计学意义(P<0.05);MiRNA-145转染组中肿瘤细胞增殖速度明显下降,细胞周期停止在G1期之前,凋亡率增高,细胞粘附力和侵袭力明显降低,促进血管生成能力明显降低,有统计学意义(P<0.05)。

  结论:MiRNA-145可以有效的抑制骨肉瘤细胞的增殖、粘附、侵袭和促血管形成能力,促进细胞凋亡,miRNA-145是一种骨肉瘤抑制基因,miRNA-145和VEGF之间可能存在相关调控关系。


分享到: