邝磊　　吕国华　　王冰　　李磊　　戴瑜亮　　陈宇乔

　　目的：检测脊索瘤组织中microRNA（miRNA）的差异性表达情况，探讨其RNA编辑。

　　方法：使用RT-qPCR（Real-time quantitative polymerase chain reaction）技术检测骶骨脊索瘤组织11种候选miRNA的表达水平，将其与髓核组织中的表达水平进行比较，对表达异常的miRNA前体（pri-miRNAs）的DNA和cDNA序列进行对比，检测是否存在RNA编辑。使用蛋白印迹法（Western blot）检测脊索瘤组织中RNA编辑的关键酶RNA腺苷脱氨酶（adenosine deaminase acting on RNA，ADARs）的表达。构建ADAR的表达载体，同时构建ERBB2和HOXA1的3′-非翻译区报告载体并转染miRNA模拟物和抑制物，将其和ADAR的表达载体共转染至人胚肾细胞293T（HEK293T细胞），用qRT-PCR检测miRNA的表达水平，并通过荧光素酶报告基因活性分析法对已测得异常表达的miRNA的靶基因ERBB2和HOXA1进行活性分析，检测ADAR与测得异常表达的miRNA的靶基因的关系。

　　结果：与髓核组织相比，脊索瘤组织中miR-10a和miR-125a的相对表达程度明显下调（P<0.05）。脊索瘤组织中miR-10a和miR-125a的前体cDNA序列中出现了腺苷酸向鸟苷酸（A-G）突变，而在髓核组织中miR-10a和miR-125a前体的cDNA序列中无此改变，miR-10a和miR-125a在成熟过程中出现了A-I RNA编辑。4组脊索瘤组织中有3组存在ADAR1过度表达，2组存在ADAR2过度表达。转染了miRNA抑制物的HEK293T细胞中ADAR1表达出现上调，而miR-10a和miR-125a的表达出现下调，miR-10a的靶基因ERBB2和miR-125a的靶基因HOXA1的荧光素酶活性显著增高；相反，转染了miRNA模拟物的HEK293T细胞中ADAR1表达出现下调，而miR-10a和miR-125a的表达出现上调，ERBB2 和HOXA1的荧光素酶活性显著降低。

　　结论：ADAR1的过度表达可能通过介导A-I RNA编辑影响miR-10a和miR-125a的成熟和表达，参与脊索瘤发生中的细胞异常增殖调控。