大鼠雪旺细胞对两种来源的成骨细胞增殖分化影响的研究

第一作者:骨科在线

2011-07-08 点击量:1022   我要说

摘要:目的 研究应用雪旺细胞(SCs)对两种来源的成骨细胞(OB)的增殖与分化的影响,为构建神经化组织工程骨提供体外实验理论依据。方法 通过采用股骨、胫骨髓腔冲洗法获得SD大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs),采用胰蛋白酶消化新生鼠颅骨获得OB及采用消化后组织块法获得SCs。将BMSCs在成骨诱导液作用3周,鉴定BMSCs向OB分化。采用96孔共培养板将第2代SCs种植于上室,颅骨来源OB种植下室,共培养为实验组,无SCs干预共培养为对照组。将诱导分化的OB种植于下室,第2代SCs种植于上室,共培养为实验组,无SCs干预共培养为对照组,分别于共培养后1、3、5、7、9d采用甲基噻唑基四唑(MTT)进行增殖比较。采用6孔共培养板,实验组上室种植SCs,下室分别种植颅骨来源及BMSCs来源的OB,不加SCs的两种来源的OB作为对照组,分别共培养后于3、7d检测两种来源OB的碱性磷酸酶、骨钙素、骨桥蛋白、骨形态发生蛋白-2 mRNA表达。结果 SCs对颅骨来源的OB在共培养3、5、7、9d 4个时间点均有明显促增殖作用,在碱性磷酸酶、骨桥蛋白、骨形态发生蛋白-2mRNA在各个时间段均起到抑制作用。SCs对大鼠BMSCs来源的OB在共培养1、3d无明显促增殖作用,在5、7、9d有明显促增殖作用,在成骨培养基的环境里,SCs可促进BMSCs诱导的OB分化。结论 选择BMSCs来源的OB与 SCs共培养更适合用于构建神经化组织工程骨。

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