周勇　　邹昌　　闵理　　石锐　　张闻力　　罗翼　　彭静　　段宏　　屠重棋　　张晖

　　目的：体外实验研究腺病毒介导Wnt10b基因表达与抑制对人BMSCs（human BMSCs，hBMSCs）成骨成脂分化的调控。

　　方法：取健康成人髂骨骨髓分离培养hBMSCs，取第4代细胞并分为4组：A、B、C组分别加入Wnt10b基因表达腺病毒载体、Wnt10b基因沉默（Wnt10b-shRNA）腺病毒载体和空病毒转染细胞，D组细胞不进行转染作为空白对照组。各组进行成骨、成脂和无诱导培养，通过ALP染色、茜素红染色和油红O染色检测Wnt10b对各组成骨成脂分化的影响，通过实时荧光定量PCR检测成骨和成脂相关基因表达，Western blot检测成骨和成脂相关蛋白表达，了解Wnt10b对hBMSCs成骨成脂转录和蛋白水平的影响。

　　结果：成骨诱导培养后ALP染色4组均呈阳性，A组呈强阳性，B组染色最弱；茜素红染色A组出现大量片状融合褐色矿化结节，B组见少许点状褐色矿化结节，C、D组出现大量点状褐色矿化结节。成脂诱导培养后油红O染色B、C、D组呈强阳性表现，其中B组最强；A组散在小团状着色区，数量较其他组明显减少。荧光定量PCR和Western blot结果示：A组成骨转录因子和蛋白表达高于B、C、D组，B组低于C、D组；而成脂转录因子和蛋白表达与成骨转录因子及蛋白表达情况相反。

　　结论：Wnt10b基因高表达促进hBMSCs向成骨分化，低表达则促进成脂分化。