河蚌提取物葡聚糖对软骨细胞Wnt通路的调控作用研究
第一作者:韦宋谱
2014-07-18 点击量:720 我要说
韦宋谱 丁道芳 王学宗 庞坚 郑昱新 徐勤光 曹月龙 詹红生
目的: 探讨河蚌肉提取物葡聚糖HBP-A(anodonta glucan HBP-A)对体外软骨细胞Wnt通路的调控作用。
方法: 体外培养大鼠软骨细胞,添加IL-1β(10 ng/ml)诱导分化,分为空白组,IL-1β组,IL-1β+IWP-2(5 μM,Wnt通路抑制剂)组,IL-1β+ HBP-A(0.3 mg/ml)组,IL-1β+IWP-2 +HBP-A共5组培养,提取各组细胞RNA和蛋白,采用Rt-PCR检测各组细胞Wnt-3a、β-catenin(24、48、72 h)及MMP-13(72 h)的基因表达;采用Western-blot检测β-catenin、MMP-13、Sox-9和Coll-Ⅱ蛋白的表达水平(48 h).
结果: 细胞经IL-1β诱导分化,Wnt-3a基因表达升高,β-catenin以及MMP-13基因和蛋白表达升高,Sox-9和Coll-Ⅱ蛋白表达下调。添加HBP-A干预可以抑制 IL-1β诱导下软骨细胞Wnt-3a基因的高表达、β-catenin以及MMP-13基因和蛋白的高表达,上调Sox-9和Ⅱ型胶原蛋白的表达。IWP-2和HBP-A合用时,Wnt-3a、β-catenin基因以及β-catenin蛋白表达最低,Sox-9蛋白表达最高。
结论: HBP-A可通过降低Wnt/β-catenin信号通路表达,延缓软骨细胞分化,并且可与Wnt抑制剂协同调节Wnt-3a、β-catenin和Sox-9因子的表达。