郑纺     权金星     王宝利

     目的:探讨甲状旁腺素（parathyroidhormone，PTH）（1_34）对UMRl06成骨细胞表达破骨细胞抑制性凝集素（osteoclastinhibitorylectin，OCIL）基因mRNA的调节及其信号转导机制。

     方法:培养大鼠UMRl06成骨细胞，采用胛H（1—34）及蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶C（PKC）、钙离子、MAPK通路的激动剂或阻断剂干预细胞不同时间后，收集细胞提取总RNA，实时荧光定量PCR检测OCILmRNA的表达水平。

     结果:PTH（1-34）以剂量和时间依赖方式促进OCILmRNA表达。10nmol／LPTH（1-34）作用6h后促进OCILmRNA表达，24h上调效应最显著，约为对照组[未加入PTH（1-34）]的2．8倍。PTH（1_34）对OCILmRNA表达促进作用的起始时间及高峰时间均晚于其对RANKL的诱导和对OPG的抑制。蛋白激酶A通路激动剂福司可林（FSK）、双丁酰基环腺苷磷酸（db．cAMP）及钙离子载体A23187均不同程度促进OCILmRNA表达，最大上调效应分别约为对照组的4．2、4．5和5．1倍。蛋白激酶C激动剂佛波酯（PMA）作用早期（2～6h）抑制OCILmRNA表达，作用6h后最大抑制率达50％；PMA作用后期（24h）对OCILmRNA的抑制作用逆转为促进效应。PKA阻断剂KT5720、钙调蛋白（CaMK）阻断剂W-7、钙调蛋白激酶Ⅱ阻断剂KN-62及丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）阻断剂PD98059均下调胛H（1-34）诱导的OCILmRNA表达，最大抑制率分别为56％、61％、63％和50％。各信号通路间存在交互作用。MAPK通路阻断剂PD98059减少PKA激动剂FSK或db—cAMP诱导的OCILmRNA表达，抑制率分别为98％和63％；但不影响A23187诱导的OCILmRNA水平增高。

     结论:PKA通路、钙／钙调蛋白通路和MAPK通路可介导PTH（1-34）诱导的OCILmRNA表达。