不同微环境对人骨髓间充质干细胞体外增殖和分化的影响
第一作者:袁君杰
2014-03-11 点击量:972 我要说
袁君杰 谢幼专 卢 霄 卢建熙
目的:评价不同微环境对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)体外增殖和分化的影响。
方法:采用全骨髓贴壁分离法培养hBMSC,传至第3代后分别在4种微环境下培养:10%FBS组、10%CS组、1g/L植物源重组人血清白蛋白(OsrHSA)组、单纯DMEM组。采用CCK-8比色法测定细胞一周增殖率。以不加成骨诱导液为对照组,实验组添加成骨诱导液后第1周和第2周行碱性磷酸酶染色,第3周和第4周行茜素红染色,评估不同时段各组细胞成骨分化程度。
结果:采用单纯DMEM组培养hBMsC,细胞增殖率基本不变,后期下降;10%FBS组、10%CS组和1g/LOsrHSA组均能显著提高hBMSC增殖率(P〈O.05),以10%FBS组效果最好。碱性磷酸酶染色和茜素红染色显示,单纯DMEM组和对照组均未发现钙沉积阳性细胞;10%FBS组、10VooCS组和1g/LOsrHSA组在各阶段均出现阳性染色,随着诱导时间延长颜色明显加深;10%CS组和1g/LOsrHSA组各时间段阳性染色程度明显较10%FBS组弱,10%CS组其次,1g/LOsrHSA组最差。
结论:细胞外基质微环境对hBMsC生长分化至关重要,含血清的微环境能更好地促进hBMSC增殖及维持hBMSC分化特性。