外源性Ⅵ型胶原对人后纵韧带细胞增殖和成骨转化的影响
第一作者:孙其志
2014-02-20 点击量:474 我要说
孙其志 张竞
目的:观察外源性VI型胶原蛋白(collagen VI, CⅥ)对人后纵韧带细胞增殖和成骨转化的影响。
方法: 取颈椎后纵韧带骨化症(ossification of the posterior longitudinalligament, OPLL)患者手术切除的后纵韧带未骨化部分和非OPLL患者因外伤手术切除的正常后纵韧带,原代培养至第3代细胞,分别记作O细胞和N细胞;两种细胞均采用、6.25、12.5、25、50、100μg/ml CⅥ刺激;CCK8法测定刺激后两种细胞1~7d光密度(D)值,评价CⅥ对细胞增殖的影响;骨形态生成蛋白-2(BMP-2)对不同浓度CⅥ刺激的细胞进行诱导骨化,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞成骨细胞转录因子-2(RunX2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)的基因表达情况。
结果: CⅥ对两种细胞的增殖均起促进作用,且随着CⅥ浓度增加,其对细胞增殖的促进作用随之增强,但达到一定浓度后这种作用会保持不变或减弱,同一时间点内50μg/ml CⅥ刺激时两种细胞的D值最大;BMP-2诱导后的两组细胞有CⅥ刺激的ALP、RunX2和OC的基因表达均高于无CⅥ刺激的对照组(P<0.05);在无CⅥ刺激的情况下,O细胞的基因表达高于N细胞(P<0.05)。
结论: CⅥ能够促进人后纵韧带细胞的增殖和成骨转化,而来自后纵韧带骨化患者的细胞则更易被促进增殖和诱导骨化,CⅥ可能具有促进后纵韧带细胞成骨的功能。